成人AV片无码免费天天看,A级大胆欧美人体大胆666,国产在线免费观看视频,久久99热狠狠色精品一区

技術文章您的位置:網(wǎng)站首頁 >技術文章 >SA-β-gal的檢測方法,你了解多少?

SA-β-gal的檢測方法,你了解多少?

更新時間:2021-09-16   點擊次數(shù):9411次
  生衰退的變化過程。細胞衰老時,衰老相關半乳糖苷酶(SA-β-gal)的活性會顯著增加,故常常檢測衰老相關半乳糖苷酶的活性以區(qū)分正常細胞與衰老細胞。目前,不同條件或化合物作用細胞后,常常用衰老相關半乳糖苷酶檢測作為細胞衰老的標志之一。
 
  SA-β-gal檢測方法主要分為細胞化學染色法和熒光法。
 
  一、細胞化學染色法:SA-βgal在pH6.0時,可將5-溴-4-氯-3-吲哚基β-D-吡喃半乳糖苷水解,產生不溶于水的藍色物質。這種藍色產物相當穩(wěn)定,固定干燥后避光可保存幾個月。通過計算總群體中藍色細胞的數(shù)量,可以很容易地確定SA-β-半乳糖苷酶陽性的細胞比例,即衰老細胞的比例。但是需要注意的是,在所有細胞中普遍存在酸性半乳糖苷酶,在pH4.0時發(fā)揮作用。其實SA-βgal發(fā)揮作用的最適pH為4.5,但是在pH4.5時,酸性半乳糖苷酶也會水解底物,因此需要使用SA-βgal次適pH6.0,才能確保藍色產物是由于SA-βgal的作用而產生的。通常我們使用pH為6.0的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。
 
  二、熒光法:熒光法需要借助另一種底物——C12FDG,不具有熒光,能透過細胞膜,但被βgal水解后可產生綠色熒光產物。利用流式細胞儀可檢測綠色熒光的產生,藉此反映βgal的表達。因此要想檢測SA-βgal的活性,需要先將溶酶體堿化至pH6.0。這一過程可使用氯喹或巴弗洛霉素A1等,可降低溶酶體的酸度,使溶酶體堿化至pH6.0。然后向細胞中加入C12FDG,孵育后制成可供流式分析細胞懸液,即可利用FC500MPL流式細胞儀等檢測SA-βgal的表達。
 
  SA-β-gal細胞化學染色法通常需要半小時染色,數(shù)小時甚至一天時間等待染色完成以觀察和計數(shù),而熒光法需要4至8小時處理細胞,1天內可完成計數(shù)。前者不僅可用于細胞培養(yǎng)液還可用以組織切片的染色,而且所需試劑和設備簡單,而后者更為高效,靈敏,定量更為準確。因此,根據(jù)實驗的不同目的可選擇不同的檢測方法。

聯(lián)


亚洲成A人片在线观看国产| 国产成人精品亚洲午夜| 久久91亚洲精品中文字幕| 粉嫩虎白女流水白浆在线播放| 欧美高清一区二区| 亚洲欧美日韩在线精品| 大胆GOGO高清在线观看| 无码人妻丰满熟妇区五十路下载| 午夜欧美精品久久久久久| 无码区A∨视频体验区30秒| 久久精品国产99国产精2020丨| 精品国产成人亚洲| 夜夜嗨AV一区二区三区| 日韩一二三区中文字幕| 一本精品99久久精品77| 消失的眼角膜电影免费观看完整版| 精品免费国产一区二区女| 中文字幕人妻激情| 99999久久久久久亚洲| 91久久久久久亚洲精品| 性高朝久久久久久久久久| 久久精品一区二区| 日本丰满大乳人妻无码苍井空| 九九热久久精品6| 九九真实偷窥短视频| 欧美一日本频道一区二区三区| 欧美理论在线| 住在隔壁欲求不满的丰满人妻| 韩漫画免费网站在线观看| 无码无套少妇毛多18P| 国产亚洲精品岁国产微拍精品| 久久一区二区中文字幕| jk女高中制服自慰网站| 欧美中文字幕在线看| 久久69精品久久久久久| 日韩精品久久久毛片一区二区| 无码少妇精品一区二区免费| 亚洲日韩一区二区一无码| 欧美一区二区亚洲va久久| 亚洲国产欧美在线看片一国产| 国产95在线 | 亚洲|