cck8細胞增殖檢測試劑盒的原理是什么?
更新時間:2023-10-13 點擊次數:2074次
cck8細胞增殖檢測試劑盒是一種常用于評估細胞增殖和生存能力的試劑。它基于雙氮唑黃(WST-8)的化學反應原理。WST-8是一種水溶性二硫蘇糖鹽,當與電子傳遞介質1-甲基四氫唑硫代甘汞(MTS)混合時,可以通過細胞內還原酶的活性來檢測細胞數量。
在
cck8細胞增殖檢測試劑盒中,WST-8與MTS以及一種電子傳遞介質PMS(鄰苯二酚硫酸鹽)混合。當此混合物加入到細胞培養(yǎng)體系中時,細胞內的還原酶(如脫氫酶等)會將WST-8還原成形成橙色產物的可溶性熒光物。這個橙色產物的量與細胞數量成正比。
在實驗中,將待測的細胞接種在培養(yǎng)皿或孔板中,并進行不同處理組和對照組。接下來,將CCK-8試劑加入每個孔中,并進一步孵育一段時間,使細胞內的還原酶與試劑發(fā)生反應。在反應結束后,通過測量溶液中產生的橙色產物吸光度的變化,可以間接地評估細胞數量。
使用吸光度檢測儀器,以450納米作為測試波長,測量樣品的吸光度值。吸光度值的增加與細胞數量的增加成正比。通常,吸光度值越高,說明細胞數量越多,代表細胞增殖能力較強;相反,吸光度值較低則表示細胞數量較少,代表細胞增殖能力較弱。
總結起來,cck8細胞增殖檢測試劑盒利用細胞內的還原酶活性將WST-8還原成可溶性熒光物,通過測量熒光物的吸光度變化,間接評估細胞數量,從而達到評估細胞增殖和生存能力的目的。這種方法簡便、快速,廣泛應用于細胞生物學和藥理學研究中。